近兩年來，基因療法可謂是風(fēng)頭無二。隨著頭一個(gè)基因療法得到了FDA的批準(zhǔn), 目前有超過2500個(gè)基因療法正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)，包括120多個(gè)關(guān)鍵的2/3期或3期臨床研究。近期，賓夕法尼亞大學(xué)傳來消息，基因療法“又下一城”，對(duì)于治療遺傳性失明（卵黃樣黃斑變性）有較好結(jié)果，科學(xué)家預(yù)計(jì)相關(guān)人體試驗(yàn)將在2年內(nèi)進(jìn)行。
卵黃樣黃斑變性又稱Best病,一般表現(xiàn)為常染色體顯性遺傳，極少數(shù)表現(xiàn)為常染色體隱性遺傳。屬于黃斑部營養(yǎng)不良性疾病。卵黃樣黃斑變性早期有時(shí)發(fā)病隱匿且進(jìn)展緩慢,患者容易忽視。電生理檢查時(shí)ERG一般正常。但所有卵黃樣黃斑變性患者及攜帶者的EOG均異常。表現(xiàn)為光峰與暗谷比值 (light-peak-dark-trough-ratio, LP/DT)降低。當(dāng)病變發(fā)展到一定階段，因黃斑部變性區(qū)邊界清楚的黃色囊樣隆起形狀近似于蛋黃而得名圖（a，b）。也可以表現(xiàn)為視網(wǎng)膜下積液（c，d）。但此時(shí)患者視力下降多不嚴(yán)重，呈現(xiàn)為病變與視力損害不相稱的臨床特征。隨著疾病進(jìn)展，視力開始出現(xiàn)明顯下降時(shí)，多有典型的較重眼底表現(xiàn)，臨床易于診斷。
上圖為卵黃樣黃斑變性狗的眼睛，左側(cè)是未治療眼，右側(cè)是基因治療5年后的眼底像。來源：賓夕法尼亞大學(xué)。
以狗為研究對(duì)象
全世界單基因黃斑變性的最常見形式之一是由與BEST1基因突變相關(guān)的顯性或隱性bestrophinopathies引起的。這種基因編碼了與視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)相關(guān)的跨膜蛋白，其突變導(dǎo)致了視網(wǎng)膜脫離和感光細(xì)胞（PR）變性死亡。
由賓夕法尼亞大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院和賓夕法尼亞州佩雷爾曼醫(yī)學(xué)院科學(xué)家所做的一項(xiàng)研究顯示，狗與人類一樣，視網(wǎng)膜中央有一個(gè)小凹處，狗可以發(fā)展出一種和人類卵黃狀黃斑變性相似的疾病。BEST1突變會(huì)損害視網(wǎng)膜，從而導(dǎo)致視力喪失。
他們?cè)谌膊∧Ｐ蜕系难芯拷Y(jié)果發(fā)表在《美國國家科學(xué)院院刊》（PNAS）雜志上，題目為“BEST1 Gene Therapy Corrects a Diffuse Retina-Wide Microdetachment Modulated by Light Exposure”。
佩雷爾曼醫(yī)學(xué)院的眼科研究教授Artur V. Cideciyan博士解釋到，“通常，眼睛里有兩個(gè)完整的視網(wǎng)膜細(xì)胞層相互交織，就像‘拉鏈’一樣，讓視覺細(xì)胞RP和支持細(xì)胞RPE相互接觸。這種疾病造成的結(jié)果的就是將這兩部分細(xì)胞分離，而我們所做的就是讓它們重新接觸，使它們緊密結(jié)合不分離。”
基因治療明顯
在犬模型中，研究人員發(fā)現(xiàn)6周齡的幼仔中RPE發(fā)育缺陷明顯。當(dāng)研究人員使用OCT的非侵入性成像技術(shù)，來檢查患有卵黃狀黃斑變性的幼犬眼睛時(shí)發(fā)現(xiàn)，光照下幼犬的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(RPE)-光感受器細(xì)胞(RP)分離顯著惡化，相反則減少。
研究小組開發(fā)了一種基于腺相關(guān)病毒（AAV）載體的基因治療構(gòu)建體，它攜帶了一份健康的犬或人類BEST1基因的拷貝，并將其注射到犬疾病模型中。結(jié)果證實(shí)，基因治療恢復(fù)了RPE和PR細(xì)胞之間的“拉鏈”連接。當(dāng)治療過的狗的眼睛暴露在光線下時(shí)，視網(wǎng)膜上的細(xì)胞分離并沒有發(fā)生，治療在注射后的四周內(nèi)非常明顯。
更令人鼓舞的是，經(jīng)過治療狗的眼睛在長達(dá)5年的時(shí)間里都沒有發(fā)病。證明這種基因療法在狗身上是有效的。“在分子水平上，我們證實(shí)了犬類和人類的BEST1基因都能糾正RPE-PR復(fù)合物的位置，并可以恢復(fù)這個(gè)關(guān)鍵接口的細(xì)胞結(jié)構(gòu)”，Cideciyan說 （封面左3）。
雖然研究人員需要繼續(xù)開展工作來評(píng)估可靠性，確定可能獲益的人類患者，并確定治療是否適合患有更嚴(yán)重疾病的患者，但他們希望臨床基因治療人體試驗(yàn)可能在幾年內(nèi)開始。
